Den molekylære diagnose svarer til et sæt molekylære teknikker, der sigter mod at identificere ændringer i DNA, der kan være vejledende for genetiske sygdomme eller kræft. Derudover anvendes molekylære teknikker i vid udstrækning til identifikation og bekræftelse af infektionssygdomme, da de repræsenterer en hurtigere og mere præcis diagnostisk metode.
Molekylær diagnose er dyr og derfor ikke meget ofte efterspurgt af læger, men det giver præcise resultater med hensyn til tilstedeværelsen af ændringen, måden det kan blande sig i organismens funktion og patientens respons på sygdommen. behandling.
Hvad er det for
Molekylærdiagnose kan udføres med flere mål, de vigtigste er:
- Identifikation af mutationer relateret til leukæmi, såsom identifikation af BCR-ABL-translokation, som er karakteristisk for kronisk myeloid leukæmi (CML);
- Mutationer, der er karakteristiske for hæmatologiske sygdomme, såsom arvelig hæmokromatose, polycythemia vera, essentiel trombocytæmi og thrombophilias, for eksempel - forstå, hvad der er thrombophilia og hvordan behandlingen er færdig;
- Molekylære ændringer, som indikerer forekomsten af kræft, fx kolorektal, lunge, bryst og hjernekræft, for eksempel;
- Diagnose af infektionssygdomme såsom hepatitis, urethritis, toxoplasmose, leishmaniasis, etc., ud over at identificere HPV-viruset .
Molekylærdiagnose er trods at blive betragtet som dyr sammenlignet med andre diagnostiske teknikker, mere præcis, da den er i stand til at oplyse ændringen relateret til en bestemt sygdom og graden af indflydelse af denne ændring i organismen og således hjælpe behandlingen af personen.
Ud over at blive brugt til diagnose af forskellige sygdomme, anvendes molekylære teknikker også til at evaluere respons på behandling, især hos mennesker med kræft, som en af de mest effektive metoder til at indikere sygdomsudvikling og tilbagefald.
Hvordan det er gjort
Molekylær diagnose kan udføres med en hvilken som helst prøve, og lægen bliver bedt om at give oplysninger om patientens tilstand, hvilket kan være urin, spyt eller det meste blod. Det er ikke nødvendigt at hurtig eller andet forberedelse til undersøgelsen.
Prøven samles og sendes til laboratoriet sammen med lægens rådgivning, der informerer den undersøgelse eller type forskning, der skal udføres. Den udførte molekylære teknik afhænger af den anmodede undersøgelse og involverer en række præcise procedurer, hvis ultimative mål er at identificere tilstedeværelsen eller fraværet af ændring, som lægen har anmodet om.
Normalt anvendes kun en lille mængde prøve, resten gemmes således, at testen gentages, hvis det er nødvendigt.
Se hvad er de vigtigste molekylære teknikker
PCR
PCR, kort for polymerase kædereaktion, er en molekylær teknik, der består i at amplificere et fragment af det genetiske materiale, det være sig DNA eller RNA, med det formål at identificere mutationer og dermed hjælpe med diagnosticering af sygdomme.
Denne teknik er lavet ved ekstraktion og oprensning af det genetiske materiale, som derefter placeres i en blanding, hvori en af bestanddelene er et restriktionsenzym, der varierer ifølge den anmodede undersøgelse, og hvis funktion er at skære materialet i fragmenter at identificere en mulig genetisk forandring. Blandingen anbringes i en termocykler, hvilket er et apparat, der virker gennem temperaturvariationen angivet af den professionelle ifølge undersøgelsen og på denne måde tillader amplifikation af det genetiske fragment. I tilfælde af konventionel PCR underkastes PCR-produktet efter amplifikation elektroforese, hvilket er en molekylær teknik baseret på fragmenternes vægt og størrelse, dvs. ifølge disse karakteristika dannes et mønster af bånd, hvis analyse er udført baseret på båndet af den positive kontrol, det vil sige i bandet, der vides at svare til den genetiske ændring.
Realtids-PCR, også kaldet qPCR, er en type kvantitativ PCR, der er foruden at identificere den genetiske ændring, er den i stand til at give information om genekspression, det vil sige, hvor meget det ændrede gen udtrykkes i organismen, og kan således bruges til at hjælpe diagnose og monitorere behandling. Real-time PCR kræver ikke elektroforese, hele processen med amplifikation og analyse af det genetiske materiale udføres af et apparat, og resultatet tolkes af en uddannet sundhedspersonel.
sekventering
Sekvensering er en molekylær teknik, der består i at bestemme DNA-nukleotidsekvensen. Sekventering sker fra en PCR-lignende reaktion, men i amplifikationsblandingen tilsættes nukleotider modificeret ved tilsætning af fluorochromer, at som modificerede materialer inkorporeres de modificerede nucleotider i DNA'et og genererer flere fragmenter, hvilket svarer til produktet fra sekventeringen.
Reaktionsproduktet anbringes i et apparat kaldet en DNA-sekventeringsenhed, hvor som fragmenterne er ramt af apparatets laser, er fluorokromerne spændt, hvilket udsender fluorescens, hvilket indikeres af apparatet ved hjælp af toppe, hver tilsvarende top til et nukleotid. Ved afslutningen af reaktionen informerer udstyret om DNA-sekvensen og hjælper dermed lægen med diagnosen genetiske sygdomme.
